Korkean sisällön seulontamikroskopia (HCS) yhdistää automaattisen fluoresenssikuvantamisen kehittyneeseen kuva-analyysiin kvantitatiivisten, moniparametristen tietojen poimimiseksi suuritehoisista soluista. Toisin kuin perinteinen mikroskopia, joka tyypillisesti sisältää manuaalisen näytteenkäsittelyn ja rajoitetun näkökentän analyysin, HCS-järjestelmät on suunniteltu kartoittamaan kokonaisia monikuoppalevyjä nopeasti ja toistettavissa. Nämä järjestelmät käyttävät automaattisia taulukoita, robottiohjattua nesteenkäsittelyä ja kehittynyttä optiikkaa (usein myös konfokaali- tai spinning-levyteknologioita) korkean resoluution kuvien tallentamiseen useilla kanavilla. Tuloksena olevat kuvat käsitellään koneoppimisen tai sääntöpohjaisten algoritmien avulla monimutkaisten solufenotyyppien, kuten morfologian muutosten, proteiinin lokalisaation tai solusyklin tilan, kvantifioimiseksi. Tämä kuvantamisen ja analyysin integrointi antaa tutkijoille mahdollisuuden tutkia tuhansia kokeellisia olosuhteita rinnakkain, mikä tekee HCS: stä välttämättömän alustan laajamittaiselle lääketutkimukselle, toiminnalliselle genomiikalle ja systeemibiologialle. HCS-mikroskooppi mahdollistaa systemaattisen, laajamittaisen toiminnallisen seulonnan solutasolla, mikä mahdollistaa geneettisten häiriöiden, kemiallisten yhdisteiden tai ympäristön muutosten vaikutusten nopean arvioinnin tärkeisiin biologisiin prosesseihin, kuten huokosten muodostumiseen kalvoissa, proteiinin kuljetukseen ja organellidynamiikkaan. Suunnitelluissa kokeissa HCS-mikroskoopissa on yhdistettävä korkea spatiaalinen erotuskyky (subsellulaaristen rakenteiden, kuten ydinhuokoskompleksien, kalvohuokosten ja mitokondrioiden dynamiikkaan ja solujen kuolemaan liittyvien proteiiniaggregaattien, ratkaisemiseksi) mahdollisimman vähäiseen valovalkaisuun ja vähäiseen valotoksisuuteen sen varmistamiseksi, että elävien solujen kuvantaminen on mahdollista pidemmällä aikavälillä. Nopeat tunnistusnopeudet ovat myös ratkaisevan tärkeitä nopeiden ja ohimenevien solutapahtumien havaitsemiseksi. Monet suunnitelluista sovelluksista edellyttävät myös korkeaa ajallista resoluutiota dynaamisten prosessien visualisoimiseksi vaarantamatta näkökenttää tai signaalin eheyttä. Kokeet edellyttävät myös moniparametrista analyysiä useilla fluoresenssikanavilla, jotta useita solutapahtumia voidaan seurata samanaikaisesti. On tärkeää, että järjestelmä tukee optogeneettisten työkalujen valo-ohjattua aktivointia ja tarjoaa joustavuutta lasertehon ja valaistusmallien käsittelyyn, jotta solujen käyttäytymistä voidaan hallita tarkasti valituilla kiinnostuksen kohteilla. Koko järjestelmä on integroitu saumattomasti, mikä takaa sujuvan toiminnan, maksimaalisen joustavuuden järjestelmän kokoonpanossa ja asennuksessa, käyttäjäystävällisen käyttöliittymän ja optimaalisen tilankäytön. Järjestelmä tarjoaa myös korkeimman automaatiotason, mukaan lukien automaattinen kuvan kohdistus, objektiivin upotusnesteen automaattinen annostelu ja poisto sekä automaattinen levynkäsittely kaikissa komponenteissa, mukaan lukien kannen poisto. Nopean tunnistuksen saavuttamiseksi järjestelmä on varustettu kahdella kameralla. Jotta voidaan varmistaa aikatehokas kuvantaminen kaivolevyjen kohdepaikoista, mikroskooppi voi yhdistää nopean matalaresoluutioisen esiskannauksen korkearesoluutioiseen kuvantamiseen ja/tai aikakatkaisukuvaukseen alueilla, jotka on tunnistettu kyseisestä esiskannauksesta (esim. tiettyjen ominaisuuksien tai harvinaisten tapahtumien tunnistamiseksi). Koska suurin osa tälle mikroskoopille suunnitelluista kokeista perustuu moniväriseen värjäykseen, mikroskooppi voi tehokkaasti tukahduttaa verenkiertoa ja ristikuulustelua ilman, että suodatinta tarvitsee jatkuvasti vaihtaa hankintojen välillä.
Selauskielellesi automaattisesti käännetty teksti
